恒溫恒濕試驗機制冷劑的選擇是一個比較復雜的技術經濟問題，需要考慮的因素很多，因為制冷劑屬于消耗品，恒溫恒濕試驗機使用幾年后，一般制冷劑消耗完了，制冷效果達不到要求，恒溫恒濕試驗機采用的是什么冷媒，需要進行全面的技術分析。
目前，市場上大多數的恒溫恒濕試驗機是采用R404作為主壓縮機的冷媒，而“冷媒”俗名雪種，學名制冷劑，在環境試驗箱行業中，制冷劑被稱為冷媒。在使用恒溫恒濕試驗機的過程中，低溫制冷部分也是非常重要的一部分，也是其比較容易出現問題的一部分;而冷媒作為低溫制冷不可或缺的部分，無論是維修或者加冷媒，都需要技術員工對冷媒有一定的了解。那為什么要使用R404作為恒溫恒濕試驗機的冷媒呢?
恒溫恒濕試驗機制冷劑考慮環保的要求必須選用符合國家環保法規的制冷劑。恒溫恒濕試驗機制冷劑考慮壓縮機的類型不同的制冷壓縮機的工作原理有所不同。體積式壓縮機是通過縮小制冷劑蒸氣的體積提高其壓力的，一般選用單位體積制冷量大的制冷劑，如R134a,R22等。制冷劑的種類很多，隨著科學技術的進步.新工質不斷出現，以適宜于不同的制冷裝置。
由于R404完全不含破壞臭氧層的CFC、HCFC，是目前世界絕大多數國家的認可并推薦的主流低溫環保制冷劑，符合美國環保組織EPA、SNAP和UL的標準，符合美國采暖、制冷空調工程師協會(ASHRAE)的A1安全等級類別(這是非常高的級別，對人身體無害)。
一般的，恒溫恒濕試驗機的標準溫度測試范圍為-70℃～150℃，這個溫度適合大部分要做溫度試驗的產品。而R404臨界溫度為72.4℃，即是說在恒溫恒濕試驗機72.4℃時開始制冷，加快恒溫恒濕試驗機的降溫速度，臨界溫度高，這是其一;R404沸點為-46℃，也就是說R404在72.4℃～-46℃之間都能制冷，制冷跨度大，這是其二。
恒溫恒濕試驗機應考慮制冷劑性質根據制冷劑的熱力性質、物理性質和化學性質，選用那些無毒、不爆炸、不燃燒的制冷劑;選用制冷劑應傳熱好、阻力小、與制冷系統用材料相容性好。所以對于有些由國家規定的行業，必須采用無毒、無污染、安全制冷效果好的制冷劑。
根據制冷劑溫度和冷卻條件的不同，選用高溫(低壓)、中溫(中壓)、低溫(高壓)制冷劑。通常選擇的制冷劑的標準蒸發溫度要低于制冷溫度10℃。選擇制冷劑還應考慮制冷裝置的冷卻條件、使用環境等。運行中的冷凝壓力不應超過壓縮機安全使用條件的規定值。恒溫恒濕試驗機可做零下60℃的溫度試驗，所以制冷劑的要求更高。和社會上的汽車空調制冷劑不同的是，汽車制冷劑只能用車外空氣做冷卻介質，對其產生影響的氣溫、風速、太陽輻射、熱輻射等因素無不在頻繁發生變化，其運行條件決定它只能選用高溫(低壓)制冷劑，過去選用R12，目前大多選用R134a。
